造成動物elisa試劑盒檢測數(shù)據(jù)不一樣的原因，除了一些實驗操作、實驗環(huán)境等客觀因素外，還有試劑盒質(zhì)量參數(shù)，如重復(fù)率、板內(nèi)差、板間差、線性稀釋、回收率等。
但是，重要的影響因素可能是作為檢測標(biāo)尺的標(biāo)準(zhǔn)品。接下來，通蔚生物就揭曉影響不同elisa試劑盒檢測數(shù)據(jù)的差異和關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)品的幾個疑惑。
一、不同的動物elisa試劑盒如何進行校準(zhǔn)?
1、國際標(biāo)準(zhǔn)物進行校準(zhǔn)：目前，elisa試劑盒比較好的校準(zhǔn)方法為應(yīng)用NIBSC/WHO推薦的標(biāo)準(zhǔn)品對試劑盒進行校準(zhǔn)。
2、高質(zhì)量的原料進行校準(zhǔn)：elisa試劑盒的檢測指標(biāo)種類可能遠遠多于NIBSC/WHO推薦的標(biāo)準(zhǔn)品，有時需要依靠高質(zhì)量的elisa試劑盒原料。
目前，進口原料依然是生產(chǎn)高質(zhì)量elisa試劑盒的前提條件之一，但是不同品牌的蛋白表達體系和質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)不同，可能會導(dǎo)致原料的性能不同，進而造成檢測數(shù)據(jù)的差異。
3、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳飿颖具M行驗證：隨著國內(nèi)生物技術(shù)的發(fā)展，自主研發(fā)蛋白表達、抗體制備、elisa試劑盒開發(fā)技術(shù)也在不斷進步。
除了應(yīng)用NIBSC/WHO推薦的標(biāo)準(zhǔn)品對試劑盒進行校準(zhǔn)外，也可用一些暫無權(quán)威機構(gòu)認(rèn)可的生物樣本進行驗證，按照科學(xué)研究方法，對種屬、性別、生命周期階段、種類等因素劃分所得到的生物樣本進行驗證。
二、elisa試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)品如何使用?
如果動物elisa試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)品是重組蛋白，請?zhí)崆?0-30分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫(18-25℃)，如果試劑盒需分多次使用，請僅取出本次實驗所需的酶標(biāo)板條和試劑，剩余板條和試劑需按照指定條件保存。
標(biāo)準(zhǔn)品工作液的配制：將標(biāo)準(zhǔn)品的凍干粉末盡量集中到西林瓶或離心管底部，加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣品稀釋液至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中，室溫水平靜置10分鐘，讓重組蛋白恢復(fù)其空間構(gòu)象，然后上下顛倒數(shù)次，待其充分溶解后，輕輕混勻，避免起泡，然后進行分裝和使用即可。
標(biāo)準(zhǔn)品的保存和棄用：如果1個月內(nèi)使用，動物elisa試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品可以暫存于4℃;如果1個月以上不用，標(biāo)準(zhǔn)品必須保存于-20℃以下環(huán)境;已配制好的標(biāo)準(zhǔn)品工作液如有剩余液體請切記要棄用，標(biāo)準(zhǔn)品工作液一定要現(xiàn)配現(xiàn)用。
