細(xì)胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒
貨號:CA1120
規(guī)格:100T
保存:4℃保存六個月有效,-20℃保存一年有效。Hoechst染色液和PI染色液需避光保存。
產(chǎn)品簡介: Solarbio生產(chǎn)的細(xì)胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒為您提供了一種經(jīng)典而又快速簡便的細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死檢測方法。 本試劑盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)雙染的方法。細(xì)胞發(fā)生凋亡時,染色質(zhì)會固縮。Hoechst33342可以穿透細(xì)胞膜,染色后凋亡細(xì)胞熒光會比正常細(xì)胞明顯增強(qiáng)。碘化丙啶(PI)不能穿透細(xì)胞膜,對于具有完整細(xì)胞膜的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞不能染色。而對于壞死細(xì)胞,其細(xì)胞膜的完整性喪失,碘化丙啶(PI)可以染色壞死細(xì)胞。上述兩種染料雙染后,使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測時,正常細(xì)胞為弱紅色熒光+弱藍(lán)色熒光,凋亡細(xì)胞為弱紅色熒光+強(qiáng)藍(lán)色熒光,壞死細(xì)胞為強(qiáng)紅色熒光+強(qiáng)藍(lán)色熒光。參考下圖,左圖為誘導(dǎo)凋亡前的正常細(xì)胞,右圖為誘導(dǎo)凋亡后的細(xì)胞。
染色快速方便,兩種染料的染色僅需20-30分鐘,一步染色即可完成。 使用方便,使用流式細(xì)胞儀檢測時,無需稀釋等配制過程,也無需再準(zhǔn)備其它任何溶液。 本試劑盒足夠檢測100個樣品,每個樣品的細(xì)胞數(shù)量可以為1×105-1×106。
產(chǎn)品內(nèi)容: 細(xì)胞染色緩沖液 100ml Hoechst染色液 0.5ml PI染色液 0.5ml 說明書 1 份
使用說明:
1. 每個樣品收集約10-100萬細(xì)胞于1.5ml離心管內(nèi),離心棄上清。細(xì)胞沉淀用0.8-1ml細(xì)胞染色緩沖液重懸。
2. 加入5微升Hoechst染色液。 3. 加入5微升PI染色液。 4. 混勻,冰浴或4℃孵育20-30分鐘。 5. 用流式細(xì)胞儀檢測紅色熒光和藍(lán)色熒光。 6. 如果使用熒光顯微鏡檢測,檢測前離心沉淀細(xì)胞,用PBS洗滌一次,再涂片觀察紅色熒光和藍(lán)色熒光。對于貼壁細(xì)胞使用熒光顯微鏡檢測,可以不收集細(xì)胞,直接依次按照上述比例加入細(xì)胞染色緩沖液、Hoechst染色液和PI染色液冰浴或4℃染色20-30分鐘。染色后PBS洗滌一次,再在熒光顯微鏡下觀察。
注意事項(xiàng):
需使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行紅色和藍(lán)色雙熒光檢測。也可使用熒光顯微鏡檢測。 染色后宜盡快檢測。 Hoechst 33342對人體有害,碘化丙啶(PI)對人體有刺激性,請注意適當(dāng)防護(hù)。 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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