離子對試劑是由強親水離子形成,反作用于樣品分子的中性離子對。當(dāng)添加在流動相中的離子對試劑進入色譜柱后,一側(cè)的烷基鏈吸附在固定相上,另一側(cè)的可離子化終端吸附帶電荷的目標(biāo)化合物,從而提高色譜柱對樣品的保留能力。
盡管可能會對色譜柱造成傷害,但是離子對試劑也有著顯而易見的優(yōu)勢:
◆ 可以顯著縮短分離時間,獲得更好的分離效果;
◆ 緩沖液制備簡單;
◆ 碳鏈長度選擇眾多,可達到增加保留時間、改善分離性質(zhì)的效果;
◆ 可有效改善峰型。
離子對試劑的種類和濃度的選擇依賴于所需樣品的理化性質(zhì)。若樣品是酸性化合物,一般選用四丁基溴化銨(SIT3060)、十二烷基san甲基氯化銨(SID3010)等離子對試劑;若樣品是堿性化合物,可以選擇戊烷磺酸鈉(SIS1100)、己烷磺酸鈉(SIS1110)、庚烷磺酸鈉(SIS1060)等離子對試劑;對于溶質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì)相差較大的混合樣品,離子對試劑種類的選擇則沒有特殊要求。同時,在選用離子對試劑時,一般盡可能優(yōu)先選用碳鏈短的離子對試劑,濃度盡量的低,這樣可以有效避免離子對試劑強保留對色譜柱產(chǎn)生的不可逆影響。
選用離子對色譜分析法固然好處多多,但它的門檻也不低,一些重要的因素需要格外重視,否則將會影響檢測的峰型結(jié)果乃至儀器、色譜柱的長期使用。
◆盡量專柱專用。大半部分離子對試劑以鹽為主,進入色譜柱的離子對試劑很難清洗干凈。使用過離子對試劑的色譜柱換到其他流動相使用后重現(xiàn)型較差。一般用過使用離子對試劑的色譜柱都是專用,不建議和其他流動相混用;
◆注意體系重現(xiàn)性。離子對試劑本身沒有緩沖能力,對pH敏感,系統(tǒng)中殘留的酸和堿都會對體系造成影響;
◆需要長時間平衡。離子對試劑在流動相和色譜柱之間的平衡時間較長,使用之前需要對色譜柱長時間平衡,梯度方法的平衡要求比較高;
◆精準(zhǔn)控制用量。在加入離子對試劑時,在保證效果的同時加入量要盡量的少。這是因為在一定范圍內(nèi),離子對試劑的加入量跟目標(biāo)樣品的保留正相關(guān),由于跟固定相存在作用,所以一旦超過濃度,不僅不會增加目標(biāo)物的保留,反而會減少。一般長鏈離子對試劑加入濃度在0.5mmol/L左右,短鏈離子對試劑加入濃度在5mmol/L左右,可以根據(jù)情況適當(dāng)增加。
索萊寶公司整合全球資源,配以高效嚴謹?shù)馁|(zhì)檢水平,重磅推出分析實驗周邊試劑第二彈——Solarbio離子對試劑系列產(chǎn)品。
◆ 純度高:所有產(chǎn)品均具有較高純度;
◆ 適用范圍廣:針對HPLC、LC/MS,均能提供對應(yīng)的用于酸性樣品和堿性樣品分析的產(chǎn)品;
◆ 產(chǎn)品種類豐富:滿足色譜分析中絕大多數(shù)需要離子對試劑情況的需求。
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