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A8350-2.5 -Agarose L.M.P 低熔點瓊脂糖

CAS 39346-81-1　
　　外觀 　 白色粉末
　　EEO　 ≤ 0.10
　　凝膠溫度 　 26℃-30℃ (1.5% gel)
　　融膠溫度 　 ≤65℃ (1.5% gel)
　　溶解性 　 無色清澈膠液 
　　水分　 　 ≤ 10% 
　　凝膠強度　 ≥200g/cm2(1.0% gel) 
　　硫化物（SO42-） ≤ 0.10% 
　　灰分　 　≤ 0.5%
　　DNA酶 & RNA酶 　 不得檢出
　　蛋白酶 　 不得檢出

正確的加熱方式對瓊脂糖的充分溶解和凝結(jié)關(guān)重要，在此，我們提供以下幾點作為正確制備瓊脂糖凝膠的操作參考。
1.瓊脂糖加熱溶解所需時間短。

2.瓊脂糖在TAE或者TBE緩沖液中不溶解，加熱時，瓊脂糖顆粒水化形成溶液，水化是時間依賴的，不同的瓊脂糖水化點不同。瓊脂糖純度高，超微顆粒，非常適合作為電泳實驗載體。對比于其他的瓊脂糖，瓊脂糖水化速度快，使用者無需煮沸過長時間，否則易導致膠液濃稠，不利于混勻，凝膠后易破損。

3.熔點范圍：62-68℃ ,凝膠溫度 ( 1.0%)：24-29℃

瓊脂糖凝膠制備
用1×TBE溶液配制1%濃度瓊脂糖凝膠
1.用于制備膠液的錐形瓶體積應為膠液體積的2-4倍，緩慢向緩沖液中加入瓊脂糖，邊加邊攪拌，防止瓊脂糖聚集。記錄瓶體和溶液總重量。
2.微波爐高火加熱30s，根據(jù)配制的溶液體積調(diào)整加熱時間。加熱時間與微波爐、瓶體大小和瓊脂糖濃度有關(guān)。
3.搖勻瓊脂糖溶液。
4.再次高火加熱30s，搖勻瓊脂糖溶液。
5.將溶液再次放回微波爐，高火加熱沸騰（大約10-35s）。接觸移動時瓊脂糖膠液可能會劇烈沸騰，小心操作，避免燙傷。從微波爐拿出后，室溫冷卻1-2min，輕輕搖晃使液體里的氣泡溢出。
6.重新放回微波爐，高火加熱，使之沸騰約15s，觀察瓊脂糖的溶解狀態(tài)，如果仍有顆粒存在，重復該步驟直所有晶體全部溶解。
7.待瓊脂糖*溶解成液體，重新稱量總重量，計算蒸發(fā)液體量，用水補齊原始重量，搖勻液體。
8.建議膠液冷卻50-55℃時灌膠，有利于凝膠孔徑均勻*，不于損傷制膠儀。灌膠前輕輕搖晃瓊脂糖溶液，釋放膠液中殘存的氣泡。
9.向制膠槽中灌膠，一般膠的厚度3-5mm，灌膠后盡量排除梳孔之間或底部的氣泡。
10.在室溫放置（30-45min）使膠充分凝結(jié)。
如果要制備不同濃度和不同體積的凝膠，請注意以下兩點：
1.在凝膠溶液煮沸前少進行2次搖勻。
2.膠液沸騰后，每隔10-15s觀察一次膠液溶解程度（間隔時間取決于膠液濃度和體積）。

相關(guān)文獻：

《The Synergistic Antibacterial Properties of Glycinin Basic Peptide against Bacteria via Membrane Damage and Inactivation of Enzymes》 作者:Hou Qi NingYing Qiu LiEmail authorZhao Sheng WangEmail authorHai Zhen Mo 期刊:Food Biophysics 影響因子:2.051 PMID:
《Role of large plasmid DNA in salt tolerance of a novel strain》 作者:Uddin, M., Jiti, Z., Saleh, M., Ekram, A., Sikdar, B., & Zaman, S 期刊:International journal of biological 影響因子:4.057 PMID:
 

A8350-2.5 -Agarose L.M.P 低熔點瓊脂糖