產(chǎn)品名稱:Solarbio Pfu DNA Polymerase
產(chǎn)品型號:PC1300
產(chǎn)品特點:PCR方法檢測無宿主殘余DNA;能有效地擴增人類基因組中的單拷貝基因;室溫存放一周,無明顯活性改變
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本公司生產(chǎn)的Pfu DNA Ploymerase是從克隆有Pyrococcus furiosis DNA Ploymerase基因的大腸桿菌中表達并經(jīng)過柱純化分離出來的重組蛋白,其分子量為90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性,它能糾正DNA擴增過程中產(chǎn)生的錯配,而傳統(tǒng)的Taq酶卻不能,其它耐熱DNA Polymerase如Vent、Deep Vent、Tli、UITma等雖具有校正功能,但Pfu酶是目前已發(fā)現(xiàn)的所有耐DNA Polymerase中出錯率低的。Pfu酶無5’→3’核酸外切酶活性,PCR反應中的延伸速度一般為0.5-1kb/分鐘,比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶熱穩(wěn)定性更好,95℃ 1小時仍保持90%以上的活性,對于GC含量很高D的模板,變性溫度可以提高到98℃而不影響其活性。Pfu酶的PCR產(chǎn)物為平末端,可加A處理再與T-載體連接或使用平末端克隆載體。一般用于DNA的高保真擴增,如基因表達克隆、基因定點突變、細胞內(nèi)基因點突變分析(SNP)和末端補平等?;钚远x:1單位(U) Pfu DNA Polymerase活力定義為在74℃,30分鐘內(nèi),以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物,將10nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。質(zhì)量控制檢測:SDS-PAGE檢測Pfu DNA Polymerase純度大于99%;經(jīng)檢測無外源核酸酶活性
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