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產(chǎn)品名稱:植物氨態(tài)氮檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC1520

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:植物氨態(tài)氮檢測試劑盒
氮素是構(gòu)成生物體的一種必需元素。銨態(tài)氮進入植物細胞后形成氨基酸或酰胺,植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。
氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應(yīng),產(chǎn)生藍紫色化合物,在 570 nm 有特征吸收峰;通過測定570 nm 吸光度,來計算氨基酸含量。

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BC1520植物氨態(tài)氮檢測試劑盒的詳細資料:

植物氨態(tài)氮檢測試劑盒

植物氨態(tài)氮檢測試劑盒

植物氨態(tài)氮含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
英文名稱:Plant ammonia nitrogen content detection kit
關(guān)鍵詞:植物氨態(tài)氮|植物氨態(tài)氮檢測|植物氨態(tài)氮測定|氨態(tài)氮
注意:正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。

貨號:BC1520
規(guī)格:50T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1 瓶,4℃保存,臨用前將試劑三倒入使其充分溶解備用。該試劑溶解后 10 天內(nèi)有效。
試劑二:粉劑×2 瓶,4℃避光保存。臨用前加 2mL 蒸餾水充分溶解。
試劑三:液體 45mL×1 瓶,4℃保存。
標準品:粉劑×1 支,10mg 半胱氨酸,4℃避光保存。臨用前加入 1.157mL 提取液,得到 1000μg/mL氮標準液。

產(chǎn)品說明:
氮素是構(gòu)成生物體的一種必需元素。銨態(tài)氮進入植物細胞后形成氨基酸或酰胺,植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。
氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應(yīng),產(chǎn)生藍紫色化合物,在 570 nm 有特征吸收峰;通過測定570 nm 吸光度,來計算氨基酸含量。

試驗中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、1mL 玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、無水乙醇、冰和蒸餾水。

操作步驟:
一、粗酶液提?。?/span>
按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1mL 提取液)加入提取液,室溫勻漿后于 25℃,12000g 離心 10min,取上清待測。
二、測定步驟:
1、 分光光度計預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長 570nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將 1000μg/mL 氮標準液用提取液分別稀釋為 200、100、50、25、12.5μg/mL。
3、 操作表:
試劑名稱(μL) 測定管 標準管 空白管
樣本              50     -       -
標準品            -      50      -
蒸餾水            -       -      50
試劑一            500    500    500
無水乙醇          500    500    500
試劑二             50     50     50
混勻后蓋緊瓶蓋封口膜封口(防止水分散失),置于沸水浴中保溫 10 min,冷卻后反復(fù)顛倒 EP管數(shù)次,將測定管 8000rpm 離心 5min 后取上清,于 570nm 測定吸光值。顯色后務(wù)必在 30min 內(nèi)測完。計算△A=A 測定管-A 空白管,△A 標準=A 標準管-A 空白管。
三、植物氨態(tài)氮含量計算:
1、標準曲線的繪制
以各個氮標準液為橫坐標,其對應(yīng)的△A 標準為縱坐標,建立標準曲線,得到標準方程 y=kx+b,將△A 帶入方程中,得到 x (µg/mL)
2、NH3-N 含量的計算
(1)按樣本鮮重計算
NH3-N 含量(µg /g FW)=x×V 提取÷W= x÷W。
(2)按蛋白濃度計算
NH3-N 含量(µg/mg prot)=x×V 提取÷(Cpr×V 提?。? x÷Cpr。
W:樣品質(zhì)量,g;
Cpr:蛋白濃度,mg/mL;
V 提?。簶悠诽崛∫嚎傮w積,1mL。
注意事項:
為保證實驗結(jié)果的準確性,需先取 1-2 個樣做預(yù)實驗,如果測定的吸光值過高(高于 1),用提取液稀釋后再測定。

相關(guān)文獻:
《SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses》 作者:Fu-Yuan Zhu,Mo-Xian Chen,Wai-Lung Chan,Feng Yang,Yuan Tian,Tao Song,Li-Juan Xi,Ying Zhou ,ShiXiao,Jianhua Zhang,Clive Lo 期刊:Journal of Proteomics 影響因子:3.537 PMID:30048775

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