產(chǎn)品名稱:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG
產(chǎn)品型號(hào):I8070
產(chǎn)品特點(diǎn):異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG貨號(hào):I8070規(guī)格:1g/5g/100g分子式:C9H18O5S分子量:238.31儲(chǔ)存條件:2-8℃純度:≥99.0%外觀(性狀):白色結(jié)晶性粉末單位:瓶
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異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG
貨號(hào):I8070
規(guī)格:1g/5g/100g
異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,英文名稱IPTG。為安慰性誘導(dǎo)物,X-gal為生色底物,二者共同用于藍(lán)白斑篩選。IPTG可誘導(dǎo)載體lac操縱子DNA區(qū)段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,該片段可與宿主細(xì)胞編碼的缺陷型β-半乳糖苷酶實(shí)現(xiàn)基因內(nèi)互補(bǔ)(α互補(bǔ))。實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ)的細(xì)菌暴露IPTG,鋪在含有X-gal生色底物的培養(yǎng)基上,可形成藍(lán)色菌落。外源DNA插入質(zhì)粒的多克隆位點(diǎn)后可破壞α互補(bǔ)作用,將產(chǎn)生白色菌落。
特性:純度 :≥99.0% (TLC) 熔點(diǎn):110-114℃
濕度(%):≤1.0 pH (5%, 水)25℃:5-7
比旋光度 (1%, 水):-34.0--29.0
溶解性:IPTG貯存液,先在8ml蒸餾水中溶解2g,定溶10ml,用0.22um濾器過濾除菌,貯存于-20℃。
異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 IPTG
異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,英文名稱IPTG。為安慰性誘導(dǎo)物,X-gal為生色底物,二者共同用于藍(lán)白斑篩選。IPTG可誘導(dǎo)載體lac操縱子DNA區(qū)段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,該片段可與宿主細(xì)胞編碼的缺陷型β-半乳糖苷酶實(shí)現(xiàn)基因內(nèi)互補(bǔ)(α互補(bǔ))。實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ)的細(xì)菌暴露IPTG,鋪在含有X-gal生色底物的培養(yǎng)基上,可形成藍(lán)色菌落。外源DNA插入質(zhì)粒的多克隆位點(diǎn)后可破壞α互補(bǔ)作用,將產(chǎn)生白色菌落。
特性:純度 :≥99.0% (TLC) 熔點(diǎn):110-114℃
濕度(%):≤1.0 pH (5%, 水)25℃:5-7
比旋光度 (1%, 水):-34.0--29.0
溶解性:IPTG貯存液,先在8ml蒸餾水中溶解2g,定溶10ml,用0.22um濾器過濾除菌,貯存于-20℃。
IPTG誘導(dǎo)原理
先
E.coli的乳糖操縱子(元)含Z、Y及A三個(gè)結(jié)構(gòu)基因,分別編碼半乳糖苷酶、透酶和乙酰基轉(zhuǎn)移酶,此外還有一個(gè)操縱序列O、一個(gè)啟動(dòng)序列P及一個(gè)調(diào)節(jié)?基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白,后者與O序列結(jié)合,使操縱子(元)受阻遏而處于關(guān)閉狀態(tài)。在啟動(dòng)序列P上游還有一個(gè)分解(代謝)物基因激活蛋白(CAP)結(jié)合位點(diǎn)。由P序列、O序列和CAP結(jié)合位點(diǎn)共同構(gòu)成lac操縱子的調(diào)控區(qū),三個(gè)酶的編碼基因即由同一調(diào)控區(qū)調(diào)節(jié),實(shí)現(xiàn)基因產(chǎn)物的協(xié)調(diào)表達(dá)。
其次
在沒有乳糖存在時(shí),lac操縱子(元)處于阻遏狀態(tài)。此時(shí),I序列在PI啟動(dòng)序列操縱下表達(dá)的Lac阻遏蛋白與O序列結(jié)合,阻礙RNA聚合酶與P序列結(jié)合,抑制轉(zhuǎn)錄起動(dòng)。當(dāng)有乳糖存在時(shí),lac操縱子(元)即可被誘導(dǎo)。在這個(gè)操縱子(元)體系中,真正的誘導(dǎo)劑并非乳糖本身。乳糖進(jìn)入細(xì)胞,經(jīng)b-半乳糖苷酶催化,轉(zhuǎn)變?yōu)榘肴樘?。后者作為一種誘導(dǎo)劑分子結(jié)合阻遏蛋白,使蛋白構(gòu)象變化,導(dǎo)致阻遏蛋白與O序列解離、發(fā)生轉(zhuǎn)錄。異丙基硫半乳糖苷(IPTG)是一種作用*的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定,因此被實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用。
參考文獻(xiàn):
《Engineering an electroactive Escherichia coli for the microbial electrosynthesis of succinate from glucose and CO2》 作者:Zaiqiang Wu,Junsong Wang, Jun Liu, Yan Wang, Changhao Bi, Xueli Zhang 期刊:Microbial Cell Factories 影響因子:4.402 PMID:30691454
《Engineering an electroactive Escherichia coli for the microbial electrosynthesis of succinate by increasing the intracellular FAD pool》 作者:Zaiqiang Wu,Junsong Wang,Xueli Zhang,Changhao Bi 期刊:Biochemical Engineering Journal 影響因子:3.371 PMID:
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