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產(chǎn)品名稱:糖代謝 β-1,3葡聚糖酶活性檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC0360

產(chǎn)品報(bào)價:

產(chǎn)品特點(diǎn):糖代謝 β-1,3葡聚糖酶活性檢測試劑盒
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下,可誘導(dǎo)細(xì)胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA 活性測定廣泛應(yīng)用于植物病理和逆境生理研究。

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BC0360糖代謝 β-1,3葡聚糖酶活性檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

糖代謝 β-1,3葡聚糖酶活性檢測試劑盒 

產(chǎn)品名稱: β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名: β-1,3-glucanase (β-1,3-GA)Assay Kit

產(chǎn)品貨號:BC0360      產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24         產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存;            參考價格:650
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: 葡聚糖酶檢測試劑盒|β-1,3-GA檢測試劑盒|葡聚糖酶|試劑盒

簡要介紹:
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下,可誘導(dǎo)細(xì)胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA 活性測定廣泛應(yīng)用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖,內(nèi)切β-1,3-葡萄糖苷鍵,產(chǎn)生還原末端,通過測定還原糖生成速率,來計(jì)算其酶活性。


產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體50mL×1 瓶,4保存;
  試劑一:粉劑×1 瓶,4保存;臨用前加入3mL 蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑4保存;     
試劑二:液體42mL×1 瓶,4保存;
  標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1支,4℃保存,含10mg無水葡萄糖(干燥失重<0.2%),臨用前加入1mL蒸餾水溶解,配制成10mg/mL葡萄糖溶液備用,4℃可保存1周,或者用飽和苯甲酸溶液溶解,可保存更長時間。
標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋1、0.8、0.6、0.40.2mg/mL。

產(chǎn)品說明
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下,可誘導(dǎo)細(xì)胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA 活性測定廣泛應(yīng)用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖,內(nèi)切β-1,3-葡萄糖苷鍵,產(chǎn)生還原末端,通過測定還原糖生成速率,來計(jì)算其酶活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提?。?/span>
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例(建議稱取約0.1g 組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。12000g4離心10min,取上清,置冰上待測。
    細(xì)菌或細(xì)胞:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);12000g 4離心10min,取上清,置冰上待測。
二、測定步驟:

  1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長540nm,蒸餾水調(diào)零。
  2. 樣本測定(在1.5mL EP 管中依次加入下列試劑):
試劑名稱(μL測定管對照管標(biāo)準(zhǔn)管空白管
樣本100100  
標(biāo)準(zhǔn)液  100 
蒸餾水 100100200
試劑一100   
充分混勻,放入37水浴60min 
試劑二600600600600

充分混勻,沸水浴5min(蓋緊,防止水分散失),流水冷卻,540nm 處記錄各管吸光值A
如果吸光值大于2,可以用提取液對樣本稀釋后測定(計(jì)算公式乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)),ΔA=A 測定-A對照。每個測定管需設(shè)一個對照管。
三、β-1,3-GA 活性計(jì)算:
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管吸光度xA標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)和濃度(y,mg/mL)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA帶入公式中計(jì)算出樣品中產(chǎn)生的還原糖的含量y值(mg/mL

  1. 按蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每mg 組織蛋白每小時產(chǎn)生1mg 還原糖定義為一個酶活性單位。
β-1,3-GA(U/mg prot)=(y×V1)÷(V1×Cpr)=y ÷Cpr

  1. 按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每g 組織每小時產(chǎn)生1mg 還原糖定義為一個酶活性單位。
β-1,3-GA(U/g 鮮重)=(y×V1)÷(W×V1÷V2)=y ÷W
(3) 按細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
單位的定義:每1萬個細(xì)胞或細(xì)菌每小時產(chǎn)生1mg 還原糖定義為一個酶活性單位。
β-1,3-GA(U/104 cell)=( y×V1)÷(500×V1÷V2)=0.002×y
V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.1mL;V2:加入提取液體積,1mLCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),萬
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相關(guān)文獻(xiàn):
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糖代謝 β-1,3葡聚糖酶活性檢測試劑盒 
 

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