elisa試劑盒出現(xiàn)誤差的情況不在少數(shù),那具體是什么會導致elisa試劑盒實驗出現(xiàn)誤差呢?接下來大家一起來探討了解一下。
一、肉眼調查稍顯色,酶標儀打印為陰性的標本在實踐工作中是難以避免的,肉眼目測成果不可靠,應以酶標儀判讀為準。
二、不同的elisa試劑盒廠家,產品其生產工藝和操作方法會略有不同,必須依照所用試劑盒嚴格操作,不然容易發(fā)生檢測成果的不確定性。
三、加樣時樣品量差錯,關于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值鄰近的標本影響極大,主張校正加樣器。
四、由陰性變?yōu)閺婈栃栽蚨酁椴僮鬟^程中漏加試劑等有關。
五、臨界值鄰近標本動搖為正?,F(xiàn)象,任何elisa試劑盒均不可避免。能夠考慮將標本做奇數(shù)次復檢。
elisa實驗的八個細節(jié):
1. 在收到試劑盒后,為保證檢測效果,需要根據(jù)說明書中保存條件正確儲存。除非特別注明,試劑盒大多是在2~8°C條件下儲存。
2. 在實驗進行前,請確認包裝中的試劑盒成分與說明書一致,再進行后續(xù)操作。
3. 溶解標準品過程中,注意標準品是否受潮,過程中要避免產生泡沫。
4. 為了避免交叉污染,配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。
5. 每次孵育時,正確使用封板膠紙可保證結果的準確性。
6. 正確洗板有助于實驗結果的穩(wěn)定性。
7. TMB顯色底物在上板前應為無色,請避光保存。加入孔板后,將由無色變成不同程度的藍色。
8. 終止液上板順序需與底物上板順序一致,加入終止液,溶液顏色由藍色變?yōu)辄S色。如果出現(xiàn)綠色,即表明終止液與底物未混勻,請充分混合。