我們在檢測細胞蛋白定位或凋亡時(TUNEL),免不了要制作細胞爬片,細胞爬片的質(zhì)量會影響最后的圖片呈現(xiàn)效果及實驗數(shù)據(jù)的準確性。今天小編教大家如何制作更好的細胞爬片。
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(一)爬片準備
1、爬片最好選用專用玻片。避免自己裁剪大小不一,以及玻璃的透明程度和吸附性都會影響最后的圖片效果。
2、根據(jù)自己的需要選擇合適大小的爬片,如6孔板、12孔板、24孔板。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 |
TC處理細胞爬片6孔板用 | YA0352 |
TC處理細胞爬片12孔板用 | YA0351 |
TC處理細胞爬片24孔板用 | YA0350 |
3、選擇好孔板和爬片,用鑷子將爬片小心放到孔板中,注意無菌操作。放入玻片前,注意向孔板中滴加少量培養(yǎng)基,再放入玻片。目的是使培養(yǎng)皿與玻片間有更好的粘合力,避免出現(xiàn)在加入細胞懸液時玻片飄起,引起雙層細胞貼片。
(二)細胞準備
1、如果是原代細胞,細胞分化時間較長,細胞分化好在進行接種,不要在孔板里進行分化。
2、如果是傳代細胞,需胰酶消化細胞后對細胞計數(shù),計算好鋪孔密度重懸到培養(yǎng)基中。
3、根據(jù)自己的需求,將計算好的細胞,鋪到孔板中。注意細胞不要太密,會影響后面拍照效果。
4、待細胞貼壁,可根據(jù)實驗需要正常進行后面的藥物干預(yù)等試驗。
5、細胞實驗結(jié)束后需要及時固定細胞來進行免疫熒光實驗,避免細胞再進行代謝反應(yīng)或死亡。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 |
胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚紅 | T1300 |
胰蛋白酶消化液(0.25%) 不含EDTA和酚紅 | T1350 |
4%組織細胞固定液 | P1110 |
北京索萊寶目前具有現(xiàn)貨單克隆和多克隆一抗一萬一千余種,基本涵蓋所有內(nèi)參、標簽和熱門信號通路?,F(xiàn)貨標記二抗近百種。所有抗體均經(jīng)過嚴格質(zhì)檢,驗證實驗包括ICC/IF等。
驗證結(jié)果展示
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