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產(chǎn)品名稱:Na+k+ ——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):BC0065

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):Na+k+ ——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒
測(cè)定意義:Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中,可催化ATP水解生成ADP和無(wú)機(jī)磷。

測(cè)定原理:Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無(wú)機(jī)磷,通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷的量來(lái)確定ATP酶活性。

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BC0065Na+k+ ——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

 

產(chǎn)品英文名Micro Na+K+——ATPase Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào):BC0065               產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣                      產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存;            參考價(jià)格:360
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:ATP酶活性檢測(cè)試劑盒|ATP檢測(cè)試劑盒|Na+k+ ——ATP檢測(cè)試劑盒|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹:
Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中,可催化ATP水解生成ADP和無(wú)機(jī)磷。
     Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無(wú)機(jī)磷,通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷的量來(lái)確定ATP酶活性。


產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容
試劑一:液體 60mL×1 瓶,4保存。
試劑二:液體4mL×1瓶,4保存。
試劑三:粉劑×2支,-20℃保存。臨用前用1mL蒸餾水溶解,現(xiàn)用現(xiàn)配。用不完的試劑-20℃可保存一周。
試劑四:液體 2mL×1 瓶,4保存。
試劑五:粉劑×1瓶,4保存。用時(shí)加入3mL雙蒸水, 4保存。
試劑六:粉劑×1, 4保存。用時(shí)加入5mL雙蒸水,溶解后4保存一周。
試劑七:粉劑×1, 4保存。用時(shí)加入5mL雙蒸水,溶解后4保存一周。
試劑八:液體5mL×1 瓶,室溫保存。
標(biāo)準(zhǔn)品:10μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)磷貯備液1mL×1,4保存。
0.5μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)磷應(yīng)用液配制:將標(biāo)準(zhǔn)品20倍稀釋,即取 0.1mL標(biāo)準(zhǔn)品加1.9mL蒸餾水充分混勻。
定磷劑的配制:H2O:試劑六:試劑七:試劑八=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷劑應(yīng)為淺黃色。若無(wú)色則試劑失效,若是藍(lán)色則為磷污染,定磷劑現(xiàn)用現(xiàn)配。
注意:配試劑用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
產(chǎn)品說(shuō)明
Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中,可催化ATP水解生成ADP和無(wú)機(jī)磷。
Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無(wú)機(jī)磷,通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷的量來(lái)確定ATP酶活性。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品酶液的制備:
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:
    細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
    組織:稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
二、測(cè)定步驟
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)660nm,蒸餾水調(diào)零。
2、酶促反應(yīng)(在EP管中加入下列試劑)

 對(duì)照管測(cè)定管
試劑一(μL6545
試劑二(μL4040
試劑三(μL2020
試劑四(μL 20
樣品  μL 100
混勻,37(哺乳動(dòng)物)或25(其他物種)準(zhǔn)確水浴10min
試劑五(μL2525
樣品 μL100 
混勻,4000g,常溫離心10min,取上清液


3定磷(1.5mLEP管中依次加入下列試劑)

 空白管標(biāo)準(zhǔn)管對(duì)照管測(cè)定管
0.5μmol/ml標(biāo)準(zhǔn)磷應(yīng)用液(μL 20  
上清液(μL  2020
蒸餾水(μL20   
定磷試劑(μL200200200200
混勻,40水浴10min,在 660nm處,記錄各管吸光值。


三、計(jì)算
1、血清(漿)Na+K+-ATPase活力的計(jì)算:
定義:規(guī)定每小時(shí)每毫升血清(漿)中Na+K+- ATP 酶分解ATP 產(chǎn)生1μmol無(wú)機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位。
Na+K+-ATP酶活力(U/mL= C標(biāo)準(zhǔn)管×A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V÷V÷T=7.5×A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中Na+K+- ATPase活力的計(jì)算:
1)按蛋白濃度計(jì)算:
定義:規(guī)定每小時(shí)每毫克組織蛋白中Na+K+- ATP 酶分解ATP 產(chǎn)生1μmol無(wú)機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位。
Na+K+-ATP酶活力(U/ mg prot)= C標(biāo)準(zhǔn)管×A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V÷Cpr×V樣)÷T =7.5×A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
2)按樣本鮮重計(jì)算:
定義:規(guī)定每小時(shí)每克組織中Na+K+-ATP 酶分解ATP 產(chǎn)生1μmol無(wú)機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位。
Na+K+-ATP酶活力(U/g鮮重)= C標(biāo)準(zhǔn)管×A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V÷(V÷V樣總×W)÷T=7.5×A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
3)按細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)計(jì)算:
定義:規(guī)定每小時(shí)每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞中Na+K+-ATP 酶分解ATP 產(chǎn)生1μmol無(wú)機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位。
Na+K+-ATP酶活力(U/104cell)= C標(biāo)準(zhǔn)管×A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V÷(V÷V樣總×500)÷T=0.015×A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
C標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)管濃度,0.5μmol/mLV總:酶促反應(yīng)總體積,0.5mL;V樣:加入樣本體積,0.2mL V樣總:加入試劑一體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,1/6小時(shí);Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬(wàn)。

注意事項(xiàng)
1、由于每一個(gè)樣都必須做對(duì)照,本試劑盒50管保證測(cè) 24Na+K+-ATP酶。
2、此法具有微量、靈敏、快速的特點(diǎn)。所以對(duì)測(cè)定所用試管要求嚴(yán)格無(wú)磷。
3、空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只要做一管。

相關(guān)文獻(xiàn):

《MicroRNA-98 reduces amyloid β-protein production and improves oxidative stress and mitochondrial dysfunction through the Notch signaling pathway via HEY2 in Alzheimer's disease mice》 作者:Fang?Zhou Chen, Ying Zhao, Hui?Zhao Chen 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30365070
《Transcriptomic analysis reveals effects of fucoxanthin on intestinal glucose transport》 作者:Wanxiu Cao,Jing Li,Yaoxian Chin,Robert W.Li, Changhu Xue,Qingjuan Tang 期刊:Journal of Functional Foods 影響因子:3.197 PMID:

 

 

Na+k+ ——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒

 

 

Na+k+ ——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒

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