名稱:MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 貨號:M1020 規(guī)格:500T/1000T 保存:MTT 溶液-20℃保存;Formazan溶解液室溫或-20℃保存。 產品內容: 500T 1000T MTT 溶液 5ml 5ml×2 Formazan 溶解液 60ml 60ml×2 產品簡介: MTT 可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物formazan。在特定溶劑存在的情況下,可 以被*溶解。然后通過酶標儀可以測定490nm 波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快,則吸光度越高;細胞 毒性越大,則吸光度越低。 使?說明: 1.收集對數期細胞,調整細胞懸液濃度,分于96 孔板,每孔180μl,3000-10000 個細胞/孔。 2.置37℃、5%CO2 溫箱培養(yǎng)使細胞貼壁,培養(yǎng)6-24 小時。 3.加入適當濃度的受試化合物,繼續(xù)培養(yǎng)適當時間。 4.小心吸去上清,加入90μl 新鮮培養(yǎng)液,再加入10ul MTT 溶液,繼續(xù)培養(yǎng)4 h。 5.然后吸掉上清,每孔加入110ul Formazan 溶解液,置搖床上低速振蕩10 min,使結晶物充分溶解。在酶 聯(lián)免疫檢測儀490 nm 處測量各孔的吸光值。 6.同時設置調零孔(培養(yǎng)基、MTT、 Formazan 溶解液),對照孔(細胞、相同濃度的藥物溶解介質、培養(yǎng) 液、MTT、 Formazan 溶解液),每組設定3 復孔。 注意事項: 1.由于使用96 孔板進行檢測,如果細胞培養(yǎng)時間較長,一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,由于96 孔板周 圍一圈容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96 孔板置于 靠近培養(yǎng)箱內水源的地方,以緩解蒸發(fā)。 2.MTT 溶液為黃色需避光保存,長時間光照會導致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時,請勿使用。Formazan 溶解 液結凍或產生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進溶解,并且必須在全部溶解并混勻后使用。 3.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 |