Ni-NTA是用于純化6xHis標(biāo)簽重組蛋白的一種純化介質(zhì),它是由4%交聯(lián)的Sepharose耦連了一種四齒螯合劑NTA而得. 它可用于在非變性或變性條件下純化任何表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的6xHis標(biāo)簽重組蛋白。NTA,含有四個(gè)螯合區(qū),較一般的三齒螯合劑能更好的結(jié)合Ni2+。6xHis 可與Ni2+螯合,從而使His標(biāo)簽蛋白結(jié)合在Ni-NTA純化介質(zhì)上,未結(jié)合的蛋白被洗滌下去,結(jié)合在介質(zhì)上的蛋白經(jīng)過一定濃度的咪唑或低pH緩沖液溫和的洗脫下來,從而得到高純度的目的蛋白。 該純化介質(zhì)與His標(biāo)簽蛋白具有的親力,可達(dá)5-20 mg/ml。 |