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革蘭氏染色試劑盒

保存：陰涼處保存，保質(zhì)期 3-6 個(gè)月。 

產(chǎn)品內(nèi)容: 

結(jié)晶紫；碘液；95%酒精；蕃紅。 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 

革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁較厚，肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，乙醇脫色時(shí)，肽聚糖脫水使孔徑縮小，故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上，呈紫色。革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，脫色后類脂外膜迅速溶解，縫隙加大，結(jié)晶紫與碘復(fù)合物溶出，因此乙醇脫色后再經(jīng)番紅復(fù)染，呈紅色。 

操作步驟： 

1. 涂片固定

菌液涂片時(shí)不可過于濃厚，干燥、固定。固定時(shí)通過火焰1-2次即可，不可過熱，以載玻片不燙手為宜。

2. 染色 

一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個(gè)步驟，具體操作方法是： 

（1）加上結(jié)晶紫后，染色 1 分鐘，水洗。 

（2）加上碘液后染色 1 分鐘，水洗。 

（3）加上 95%酒精,搖動(dòng)玻片,根據(jù)涂片厚度,脫色約 20-60 秒，水洗，吸去水分。 

（4）加上蕃紅后，染色 1 分鐘，水洗。 

（5）吸干或在空氣中涼干后，油鏡鏡檢。 

革蘭氏染色的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握酒精脫色程度，如脫色過度，則陽性菌可被誤染為陰性菌；而脫色不夠時(shí)，陰性菌可被誤染為陽性菌。此外，菌齡也影響染色結(jié)果，如陽性菌培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng)，或已死亡及部分菌體自行溶解，都常呈陰性反應(yīng)。 

3. 結(jié)果觀察：革蘭氏陰性菌呈紅色，革蘭氏陽性菌呈紫色。以均勻分散開的細(xì)菌的革蘭氏染色反應(yīng)為準(zhǔn)，過于密集的細(xì)菌，常常呈現(xiàn)假陽性。

注意事項(xiàng)：

1．標(biāo)本涂片不能太厚，嚴(yán)格按操作要求進(jìn)行。若涂片較厚，應(yīng)延長(zhǎng)脫色時(shí)間，直不再出現(xiàn)紫色為止。 

2．玻片通過火焰溫度不能太高。 

3．碘液變透明，則不能使用。 

4．水洗時(shí)動(dòng)作要輕柔,沿載玻片對(duì)角線方向用洗瓶沖洗,以免把菌體沖掉。